Daniel Isaac Oliva Gil

Colaboración, con el objetivo de aprender y mejorar, en el Instituto de Tecnologías Biomédicas (ITB) de Tenerife, en el programa de Neurolobiología y Enfermedades del Sistema Nervioso, dentro del Grupo de Investigación de Bases Moleculares de Canalopatías Humanas, en el periodo 2024-2025. Durante este periodo aprendí a realizar transformaciones bacterianas; extraje ADN plasmídico mediante miniPrep y cuantifiqué su concentración con NanoDrop; llevé a cabo reacciones de PCR y visualicé los productos por electroforesis en gel de agarosa; preparé placas vertiendo medio de cultivo estéril, donde luego iban a ser sembradas las bacterias en las que se realizaban las transformaciones; hice pase de cultivos celulares; Realicé técnicas de electrofisiología, como Patch-Clamp, con el software pCLAMP; y adquirí experiencia en transfecciones celulares para introducir plásmidos en líneas celulares.

Tras mi etapa inicial, me incorporé a realizar el TFG en el programa de Enfermedades de Base Genética y Raras dentro del grupo de Metabolismo de la Cromatina. En este periodo, mi labor se ha centrado en la caracterización de las interacciones físicas entre los complejos de mantenimiento estructural de los cromosomas (SMC): cohesina, condensina y Smc5/6, utilizando Saccharomyces cerevisiae como organismo modelo. Para ello, he llevado a cabo la generación sistemática de nuevas cepas mediante ingeniería genética, empleando plásmidos y el diseño de cebadores quiméricos para la amplificación de casetes de marcaje. Esta metodología me ha permitido introducir marcajes fluorescentes y de epítopos mediante recombinación homóloga in vivo, permitiendo el estudio de subunidades específicas.

En el ámbito experimental, he desarrollado competencias avanzadas en el análisis de la dinámica celular y la bioquímica de proteínas. He gestionado cultivos celulares y A he ejecutado ensayos de co-inmunoprecipitación (Co-IP) para identificar interacciones físicas no canónicas entre los complejos SMC, complementados con técnicas de Western Blot para proteínas de alto peso molecular. Para estas últimas, he aplicado protocolos de extracción desnaturalizante por precipitación ácida con TCA y lisis mecánica con FastPrep, asegurando la integridad de las muestras para su posterior análisis.

Finalmente, he garantizado el mantenimiento y la trazabilidad del banco de cepas del laboratorio, realizando transformaciones con fragmentos lineales de ADN y seleccionando los clones positivos mediante el uso de diversos marcadores de resistencia. Mi experiencia en este grupo incluye también la preservación a largo plazo de los recursos biológicos mediante criopreservación a -80°C y la interpretación de datos genómicos para profundizar en la estabilidad y arquitectura del genoma eucariota.